摘要
目的探讨蒲公英提取物(ETM)对人低分化胃癌MKN45细胞及其模型裸鼠肿瘤的抑制作用以及相关机制。方法将体外培养的MKN45细胞分为实验组和对照组,实验组加入不同浓度的ETM处理,对照组加入磷酸盐缓冲液(PBS)。四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测肿瘤细胞生长抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡,反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白印迹法检测Survivin mRNA和蛋白表达。使用MKN45细胞建立低分化胃癌裸鼠模型,将造模成功的荷瘤裸鼠用随机数字表法分成实验组和对照组,实验组腹腔内注射ETM 0.4 ml(100 mg/ml),对照组仅注射等量0.9%氯化钠溶液,3 d给药1次,共42 d;观察移植瘤的质量及体积变化,免疫组织化学法检测移植瘤组织Survivin蛋白的表达。结果 ETM浓度达到0.2μmol/L时能够抑制MKN45细胞增殖,促进MKN45细胞凋亡,且呈浓度和时间依赖性(P<0.05)。实验组Survivin mRNA及蛋白表达均下调,呈浓度依赖性,48 h实验组(ETM 0.1、0.2、0.4、0.8、1.6μmol/L)和对照组Survivin mRNA表达水平分别为0.18±0.04、0.14±0.03、0.11±0.01、0.08±0.04、0.06±0.02和0.19±0.03(F=132.35,P<0.05);Survivin蛋白表达水平分别为0.86±0.03、0.60±0.05、0.43±0.01、0.22±0.01、0.14±0.03和0.92±0.06(F=76.57,P<0.05)。荷瘤裸鼠实验显示,实验组移植瘤的体积和质量[(326±27)mm3、(0.31±0.13)g]均低于对照组[(843±14)mm3、(0.78±0.25)g],差异有统计学意义(t=3.94,P=0.043;t=3.27,P=0.037),抑瘤率为(60.3±3.2)%。免疫组织化学结果显示,实验组Survivin表达阳性细胞数[(28±11)个]少于对照组[(152±20)个],差异有统计学意义(t=4.32,P=0.029)。结论 ETM对人低分化胃癌MKN45细胞及其模型裸鼠肿瘤有抑制作用,其机制可能与ETM下调肿瘤细胞Survivin表达有关。
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单位延边大学附属医院