猪γ干扰素的表达及抗病毒活性研究

作者：梁望旺; 周丹娜; 杨克礼; 刘泽文; 段正赢; 邓均华; 郭锐; 袁芳艳; 徐涤平; 田永祥

来源：湖北农业科学, 2011, 50(11): 2283-2286.

DOI：10.3969/j.issn.0439-8114.2011.11.036

• 猪γ干扰素
• 克隆
• 原核表达

利用RT-PCR技术从有丝分裂原刀豆素(ConA)诱导的长白猪外周血淋巴细胞总RNA中扩增出猪γ干扰素的成熟肽基因(mPolFN-γ),并将其亚克隆到原核表达载体pET-28a中,构建重组表达载体pET-mPoIFN-γ.经PCR、酶切及测序鉴定后,转化到大肠杆菌BL21(DE3)进行IPTG诱导表达,经SDS-PAGE和Western-blot检测,表明猪γ干扰素获得了高效表达,并具有免疫活性,表达产物约为20.5 kDa,主要以包涵体形式存在,产物经纯化、复性得到具有生物学活性的蛋白.利用细胞病变抑制法对其在H-PRRSV/Marc-145系统上进行抗病毒活性测定,结果表明其抗H-PRRSV活性为7.68×103U/mg.为进一步研究猪γ干扰素功能奠定了基础和理论依据.

• 单位
  湖北省农业科学院畜牧兽医研究所