ADV-tk重组腺病毒的构建及检测

作者：陈耿臻; 韩慧; 许铭炎; 邓小玲

来源：中国普外基础与临床杂志, 2010, (07): 703-706.

• 基因治疗
• 自杀基因
• 胸苷激酶基因
• 腺病毒载体 Gene therapy
• Suicide gene
• Thymidine kinase
• Adenovirus vector

目的应用基因重组技术,构建含胸苷激酶(tk)自杀基因的复制缺陷型腺病毒(ADV-tk),为进一步研究tk自杀基因对肿瘤的抑制作用奠定基础。方法采用细胞内同源重组法构建携带tk基因的ADV-tk,经PCR鉴定正确后进行扩增、纯化和滴度测定。重组腺病毒ADV-tk体外转染人肝癌SMMC-7721细胞,RT-PCR检测tk基因的整合和表达。建立裸鼠人肝癌动物模型,腹腔注射ADV-tk,荧光显微技术观察ADV-tk基因在肝脏的转染情况和对肿瘤细胞的抑制作用。结果构建的重组腺病毒中带有tk基因,经扩增、纯化后测得重组腺病毒滴度为1.4×1010pfu/ml。ADV-tk体外转染SMMC-7721细胞后,...

• 单位
  汕头大学医学院第二附属医院