基于转录组测序分析细粒棘球绦虫原头蚴与巨噬细胞RAW264.7免疫互作相关基因

作者：王正荣^*; 马勋; 张艳艳; 孟季蒙; 薄新文^*

来源：畜牧兽医学报, 2022, 53(11): 3975-3988.

• 细粒棘球绦虫
• 巨噬细胞RAW264.7
• 差异表达
• 免疫调控

旨在解析细粒棘球绦虫原头蚴与巨噬细胞RAW264.7免疫互作相关的基因，为进一步阐明细粒棘球绦虫原头蚴调控宿主免疫反应及寄生适应机制提供理论依据。将细粒棘球绦虫原头蚴和巨噬细胞RAW264.7共培养24 h,收集原头蚴和RAW264.7细胞，提取总RNA,构建cDNA文库，利用RNA sequencing技术进行转录组测序分析。当细粒棘球绦虫原头蚴与巨噬细胞RAW264.7共培养24 h后，和0 h对照组相比，原头蚴处理组分别有435个基因的表达出现显著差异变化，其中，上调表达的基因为227个，包括HSP70、HSP10、Eg95前体分子、AgB、FABP和囊泡运输蛋白SC22B等；下调表达的基因为208个，包括EF-hand蛋白、Cathepsin、跨膜蛋白144、内固醇类受体和MAPK7等。GO分析结果表明，差异表达的基因主要富集在血红素转运、铁配位实体运输、细胞外间质、核糖核酸酶MRP复合物、丝氨酸型内肽酶抑制剂活性以及α-半乳糖苷酶活性等过程。KEGG分析结果表明，差异表达的基因主要参与剪接体、内吞作用、内质网的蛋白质处理、吞噬体、MAPK信号通路以及钙信号通路等。当巨噬细胞RAW264.7与细粒棘球绦虫原头蚴共培养24 h后，和PBS对照组相比，原头蚴处理组的RAW264.7细胞共有3 745个基因的表达出现显著变化，其中，1 159个基因出现上调表达，2 586个基因出现下调表达。GO分析结果显示，差异表达基因主要富集在代谢过程、细胞内组分、细胞内、细胞器以及膜结构细胞器等。KEGG信号通路的分析结果表明，差异表达的基因主要参与代谢通路、核糖体通路、剪接体通路、RNA转运以及泛素介导的蛋白水解等通路。同时研究随机选取了部分差异表达的基因进行了qRT-PCR验证，结果表明，其表达趋势与RNA-seq结果一致。综上所述，当细粒棘球绦虫原头蚴面对宿主巨噬细胞免疫压力时，可引起其基因的差异表达，其中，原头蚴中的AgB、FABP1和Kunitz型丝氨酸蛋白酶抑制剂等具有免疫调节作用的分子表达明显上调，推测其可能参与宿主的免疫调控，进而有利于虫体在宿主的寄生和免疫逃避。

• 单位
  石河子大学; 动物科技学院; 新疆农垦科学院畜牧兽医研究所