摘要
目的观察微重力生物反应器内拟胚体(EBs)的形成及其EBs来源细胞的肝细胞与心肌细胞分化。方法将未分化鼠胚胎干细胞(ES细胞)以1×106/mL移入微重力反应器内旋转培养,6d后取出反应器内形成的EBs接种于培养板培养,使用含DMSO、地塞米松等IMDM培养液继续培养10d。动态观察EBs形成和EBs来源细胞分化细胞形态特征,采用Western blot、免疫荧光染色方法检测EBs来源细胞肝细胞及心肌细胞标志物的表达。结果生物反应器旋转培养6d形成均一的拟胚体,接种后移行细胞中出现肝细胞特征样细胞和自发性搏动细胞,Western blot检测到EBs来源细胞肝细胞标志物Alb表达,免疫荧光染色分别检测出肝细胞标志物Alb、AFP和心肌细胞标志物GATA4的表达。结论微重力生物反应器可加快EBs的形成,EBs来源细胞可有效地向肝细胞及心肌细胞分化,两种细胞之间可能存在相互作用。
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