VEGF_(165)在哺乳动物细胞中的稳定表达

作者：唐浩; 陈勇; 夏昆; 文娟; 卿志荣; 赵天力; 杨进福; 胡冬煦

来源：中国医师杂志, 2004, 6(07): 868-871.

DOI：10.3760/cma.j.issn.1008-1372.2004.07.002

• VEGF165
• CHO细胞
• 转基因
• 基因表达 VEGF
• CHO cell
• Gene transfection
• Gene expression

目的　探讨pcDNA3 1-VEGF1 65质粒对哺乳动物细胞的表达和转染。方法　将pcDNA3 1-VEGF1 65质粒用电转的方法导入CHO细胞中 ,G418筛选细胞克隆。通过RT -PCR、ELISA、Westen -blot在转录水平和蛋白质水平上检测VEGF1 65在转基因CHO细胞中的表达。通过内皮细胞增殖实验和血管通透性实验检测所表达的VEGF1 65的生物学活性。结果　获得有G418抗性的CHO细胞克隆。RT -PCR扩增出一条大小约 60 0bp的特异性泳带 ,测序结果与VEGF1 65mRNA一致。ELISA显示细胞培养上清的VEGF浓度约为 10～ 2 0ng/ml。...

• 单位
  医学遗传学国家重点实验室; 中南大学湘雅二医院