摘要
为阐明Adp A与淀粉酶产色链霉菌Streptomyces diastatochromogenes 1628形态分化和合成丰加霉素(Toyocamycin,TM)的相关性。本研究设计简并引物成功克隆了来源于淀粉酶产色链霉菌1628大小为1263 bp的adp Asd基因(Gen Bank登录号:JX847412)。结果发现,Adp Asd的氨基酸序列与灰色链霉菌Streptomyces griseus的Adp Ag及天然色链霉菌Streptomyces coelicolor的Adp Ac的同源性分别为80.7%和78.9%。将adp Asd基因置于载体p IB139启动子Perm E*下游,构建了重组质粒p IB139-adp Asd,将其通过接合转移法分别转入菌株1628-T15(高产TM)和1628-T62(低产TM,孢子合成受阻)中,获得重组菌1628-T15A和1628-T62A。结果表明,与出发菌株1628-T62相比,重组菌1628-T62A产孢能力得到一定程度的恢复;重组菌1628-T15A与出发菌株1628-T15相比,整体形态无明显变化。摇瓶发酵试验表明,重组菌1628-T62A较出发菌株1628-T62的TM合成能力显著提高,最终TM产量提高了近3倍,而重组菌1628-T15A的TM产量比出发菌株1628-T15仅有小幅提升。以上结果证实adp Asd参与淀粉酶产色链霉菌1628形态分化以及TM合成,为今后深入理解adp Asd的分子调节机制奠定了基础。
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单位生命科学学院; 中国计量大学