运动发酵单胞菌限制-修饰系统缺失突变株的构建及其性质分析(英文)

作者：吴波; 何明雄; 冯红; 张艳; 胡启春; 张义正

来源：应用与环境生物学报, 2013, 19(02): 189-197.

• 运动发酵单胞菌
• 限制-修饰系统
• 基因敲除
• 电转化
• 乙醇发酵

低遗传转化率阻碍了产乙醇模式菌——运动发酵单胞菌的遗传或分子生物学操作.本研究将运动发酵单胞菌菌株ZM4的5个限制-修饰系统相关基因失活,构建了5个限制-修饰系统突变菌株.研究结果表明:在突变株Zmmrr和Zm1933中,甲基化穿梭表达质粒pBBR1MCS-tet的电转化率分别提高了17倍和2倍,而限制修饰基因ZMO0575的失活则明显降低了甲基化修饰质粒和非甲基化质粒的转化率.较之其它3个突变株,突变株Zmmrr和Zm1933具有更高的遗传稳定性.发酵实验结果进一步表明这些限制-修饰系统突变株并未显著改变运动发酵单胞菌的主要性质,例如细胞生长、葡萄糖利用率和乙醇产量等.研究运动发酵单胞菌的限制-修饰系统将有助于构建适合于分子遗传操作的基因工程菌株.

• 单位
  生物资源与生态环境教育部重点实验室; 四川大学; 农业部沼气科学研究所; 生命科学学院