摘要
目的检测Ano5基因敲除小鼠骨髓间充质细胞成骨能力改变及成骨相关因子的表达。方法选取12周龄雄性小鼠,处死后抽取骨髓行骨髓间充质细胞原代培养,碱性磷酸酶(ALP)活力测定和茜素红染色观察其成骨能力。提取RNA检测成骨相关因子的基因表达。实验分为Ano5+/+野生型组、Ano5+/-杂合组和Ano5-/-纯合组。结果敲除组Ano5-/-和Ano5+/-骨髓间充质细胞与野生型相比,ALP活力明显增强(P<0.01),矿化结节数目和面积增加,在成骨诱导分化过程中,成骨相关因子Ocn,Col1α1,Osterix,Runx2,Opg/Rankl表达明显上调(P<0.01),而Ano6表达明显下调(P<0.01)。结论 Ano5基因对骨髓间充质细胞成骨能力有负向调节作用,在骨形成过程中发挥重要作用。
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