某型血液筛查核酸检测扩增系统方法学性能验证评价

作者：黄华霖; 郑欣; 曾劲峰^*

来源：中国输血杂志, 2021, 34(02): 128-131.

DOI：10.13303/j.cjbt.issn.1004-549x.2021.02.008

• 献血者
• 核酸检测/血液筛查
• 性能验证

目的对献血者罗氏COBAS S201血液筛查核酸检测混检系统关键性能指标参数进行验证,为血液病毒核酸检测混检系统性能的确认提供支持数据,并建立科学可行验证方案。方法根据《分子诊断检验程序性能验证指南》(CNAS-GL039:2019)的验证基本要求,对ROCHE COBAS S201核酸检测混检系统的95%检出限、符合率、抗干扰能力、操作人员比对等4个关键参数指标进行全面性能验证,与厂家提供的说明参数进行比对,评估实验室检测系统的实际性能,保证血液检测质量。结果对实验室2台COBAS S201核酸检测混检系统进行厂家声明的95%检出限定值进行单检(PP1)重复检测5次检测,均为100%检出靶核酸,测定下限验证通过。使用单检模式检测5个不同HBV DNA浓度(25～400)IU/mL、5个不同HCV RNA浓度(25～400)IU/mL、5个不同HIV RNA浓度(100～1 000) IU/mL、5个阴性管,结果20支管所有检测值与真实值100%一致,性能参数"符合率"验证通过。对含有脂肪血、溶血、ALT>50 mL/L及梅毒阳性内源性干扰物质的3倍95%检出限定值标本进行重复检测3次,反应率均为100%(3/3),检出率达到100%;对照组(不含或在正常范围干扰物质)在3倍95%检出限这种极低的核酸定值标本同样检出反应性结果,两者的检出率统计学没有显著差异(P>0.05),充分说明献血者血液含有验证浓度的干扰物质(脂肪血、溶血、ALT≥50及梅毒阳性),对检出HBV/HCV/HIV病毒靶核酸无显著影响。同样的仪器同样的试剂同样的标本,由不同的操作人员来进行上样检测,结果出现100%一致性,可初步评估操作人员之间的操作在本次验证并没有差异。结论本研究建立的核酸混检系统的方法学性能指标(95%检出限、符合率、抗干扰能力、操作人员比对)验证方案,具有简易、灵活、科学、可行的特点,可为国内采供血机构同行核酸验证工作提供借鉴与数据支持。

• 单位
  深圳市血液中心