猪PRRSV和PCV2双重TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立及应用

作者：侯月娥; 伍建敏; 何永龙; 李中圣

来源：中国预防兽医学报, 2016, 38(03): 221-225.

DOI：10.3969/j.issn.1008-0589.2016.03.12

• 猪繁殖与呼吸综合征病毒
• 猪圆环病毒Ⅱ型
• 双重Man荧光定量PCR

为快速及定量的检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2),本研究根据GenBank中登录的PRRSV和PCV2基因组确定了其基因保守序列,分别设计其特异性探针和引物,建立了PRRSV-PCV2双重TaqMan荧光定量PCR检测方法。特异性试验显示该方法对猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪伪狂犬病毒及猪瘟病毒的检测结果均为阴性。对PRRSV和PCV2的检测灵敏度均达10拷贝/μl。重复性试验结果显示批内、批间变异系数均小于4%。应用该方法对60份已知临床病料进行检测,结果检出PRRSV和PCV2阳性感染率分别为30.67%和35%,混合感染率为11.67%,与已知结果的符合率为100%。该方法具有敏感、快速、特异、定量、重复性、稳定性好等优点,在用于PRRSV和PCV2感染的快速鉴别诊断的同时,在细胞培养特性以及疫苗生产检测中也具有广阔的应用前景。

• 单位
  广东海大集团股份有限公司