科研之友
微信
新浪微博
Facebook
分享链接
摘要
为制备抗A型塞内卡病毒(SVA)VP1蛋白的单克隆抗体，并初步应用于A型塞内卡病毒的检测，本研究构建了SVA VP1原核重组表达质粒pET30a-GST-VP1(528 bp)。将重组质粒转化大肠埃希菌BL21感受态细胞并大量表达VP1重组蛋白，利用纯化的VP1重组蛋白免疫BALB/c小鼠，取其脾细胞与骨髓瘤细胞(SP2/0细胞)进行融合，经过细胞亚克隆筛选，获得杂交瘤细胞。将其选为腹水生产细胞株，最后纯化单克隆抗体，通过Western blotting和间接免疫荧光试验对其进行鉴定。结果显示，本研究获得1株能够稳定分泌抗VP1重组蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞，其亚型重链为IgG2a、轻链为Kappa链；Western blotting和间接免疫荧光检测显示，该单克隆抗体能够特异性识别SVA病毒粒子。本研究成功制备的抗SVA VP1蛋白单克隆抗体可为进一步研究A型塞内卡病毒VP1蛋白的生物学功能及A型塞内卡病毒致病机制提供有效途径。
- 单位
