1, 25(OH)2D3对柯萨奇病毒B3诱导小鼠心肌炎症反应的影响及机制

作者：刘媛媛; 董美娟; 卜艳龙; 崔兆辉^*

来源：中华医学杂志, 2023, 103(36).

• 病毒性心肌炎
• 钙-钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ
• 炎症
• 内质网应激
• 小鼠

目的探讨1, 25二羟维生素D3[1, 25(OH)2D3]对柯萨奇病毒B3(CVB3)诱导小鼠心肌炎症反应的影响及机制。方法将雄性野生型(WT)小鼠和1α羟化酶基因敲除[1(OH)ase-/-]小鼠分为WT组、WT+CVB3组、1(OH)ase-/-+CVB3组和1(OH)ase-/-+CVB3+VD3组, 每组8只。实时荧光定量PCR测定促炎症因子白细胞介素(IL)1β、IL-6、干扰素γ(IFN-γ)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)mRNA水平;HE染色观察心肌组织病理学改变;TUNEL染色及流式细胞仪检测心肌细胞凋亡;Fluo-4/AM荧光探针检测心肌细胞内的钙离子含量;Western印迹法检测钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)及内质网应激相关葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)的表达水平。结果与WT组相比, WT+CVB3组小鼠心肌中促炎症因子IL-1β(14.88±3.32比1.03±0.02, P=0.009)、IL-6(7.00±1.09比1.81±0.18, P=0.005)、IFN-γ(4.70±1.11比1.34±0.34, P=0.006)、TNF-α(17.20±3.22比1.02±0.12, P<0.001)mRNA水平均升高, 炎症细胞浸润增多, 心肌细胞凋亡率增加(16.66%±1.09%比7.85%±1.12%, P=0.012), 心肌细胞胞质中游离Ca2+增加(2.98±1.05比0.96±0.10, P=0.006), 磷酸化CaMKⅡ(pCaMKⅡ)(1.97±0.34比1.00±0, P<0.001)、GRP78(1.78±0.19比1.00±0, P=0.005)及CHOP(1.62±0.09比1.00±0, P=0.002)蛋白表达增加;上述心肌细胞损伤指标在1, 25(OH)2D3缺乏的1(OH)ase-/-+ CVB3组更显著;而在给予1, 25(OH)2D3补充的1(OH)ase-/-+CVB3+VD3组, 上述心肌细胞损伤指标均改善(均P<0.05);此外, CaMKⅡ特异性抑制剂可同样降低CVB3感染小鼠的心肌损伤和细胞凋亡率。结论 1, 25(OH)2D3缺乏可通过CaMKⅡ过度活化加重小鼠心肌炎症反应。

• 单位
  南京医科大学