M1型库普弗细胞极化在三氯乙烯致敏小鼠肝脏损伤中的作用

作者：徐琼影; 张家祥; 杨呓; 李娜; 代玉莹; 黄丽萍; 朱启星^*

来源：环境与职业医学, 2019, 36(10): 927-933.

DOI：10.13213/j.cnki.jeom.2019.19387

• 三氯乙烯
• 肝脏
• 库普弗细胞
• 免疫性损伤
• 职业性药疹样皮炎

[背景]三氯乙烯(TCE)可致职业性药疹样皮炎并伴有严重的肝脏损伤,是致死的主要原因之一,但其发生机制尚不清楚。[目的]观察TCE致敏小鼠肝脏中库普弗细胞(KCs)极化的情况,探讨KCs的M1型极化在TCE免疫性肝损伤中的作用。[方法]36只雌性BALB/c小鼠,6～8周龄,随机分为4组:空白对照组(n=5),溶剂对照组(n=5),TCE处理组(TCE组)(n=11),抑制剂处理组(TCE+GdCl3组)(n=15),适应性喂养一周。按照本课题组的建模方法建立TCE致敏模型。在末次激发24 h后对TCE组和TCE+GdCl3组进行皮肤评分,将TCE组和TCE+GdCl3组小鼠分为致敏阳性组和致敏阴性组;末次激发72 h后处死小鼠,取肝脏。全自动生化分析仪检测肝脏损伤指标丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)水平,HE染色法检测小鼠肝脏病理变化,免疫组化法检测KCs的表面标志物F4/80的表达情况,免疫荧光法检测小鼠肝脏M1型巨噬细胞表面标志物CD11c的表达水平,免疫组化法检测小鼠肝脏肿瘤坏死因子(TNF)-α的表达情况。[结果]TCE组致敏率为45.45%(5/11),TCE+GdCl3组致敏率为33.33%(5/15),差异无统计学意义(P> 0.05)。血清ALT和AST水平在空白对照组、溶剂对照组之间差异无统计学意义(P> 0.05);与溶剂对照组和TCE阴性组相比,TCE阳性组血清ALT和AST升高有统计学意义(P <0.05),TCE阳性组ALT及AST水平分别为(115.05±13.74)U/L和(224.68±30.98)U/L;TCE+GdCl3阳性组ALT及AST水平分别为(97.59±9.16)U/L和(124.69±11.26)U/L,低于TCE阳性组(P <0.05)。HE染色结果显示:对照组及阴性组小鼠肝脏细胞形态正常,染色均匀;TCE阳性组小鼠肝脏细胞形态异常,细胞空泡样变性;TCE+GdCl3阳性组小鼠肝脏部分细胞出现水肿。肝脏F4/80的免疫组化结果显示:空白对照组、溶剂对照组表达较低,TCE阳性组F4/80大量沉积,TCE+GdCl3阳性组表达较TCE阳性组减少(P <0.05)。肝脏CD11c免疫荧光结果显示:空白对照组、溶剂对照组CD11c表达较少,TCE阳性组CD11c表达水平较高,而TCE+GdCl3阳性组该指标表达水平下降。免疫组化结果显示:空白对照组和溶剂对照组TNF-α表达水平极低,TCE阳性组肝脏TNF-α大量沉积,TCE+GdCl3阳性组肝脏中TNF-α表达水平较TCE阳性组下降(P <0.05)。[结论]KCs在TCE致敏小鼠免疫性肝损伤中发挥重要作用,其M1型极化会加重小鼠肝脏损伤。

• 单位
  安徽医科大学第一附属医院; 安徽医科大学; 公共卫生学院