慢病毒介导的GATA6基因沉默对肝癌Huh-7细胞凋亡的影响

作者：才锦麟; 阿力亚; 何强

来源：中国病理生理杂志, 2015, 31(05): 938-942.

DOI：10.3969/j.issn.1000-4718.2015.05.030

• GATA6基因
• 慢病毒
• RNA干扰
• 肝细胞癌

目的:研究GATA6基因沉默对肝癌Huh-7细胞凋亡的影响,同时探讨可能的作用机制。方法:构建靶向GATA6基因的慢病毒干扰载体,用流式细胞术确定转染效率,用RT-PCR和Western blotting法检测其对人类肝细胞癌细胞株Huh-7的干扰效果,流式细胞术检测细胞凋亡比例,Western blotting法检测各转染组Huh-7细胞NF-κB及Bcl-2蛋白表达。结果:靶向GATA6基因的慢病毒干扰载体感染肝癌Huh-7细胞后,转染效率为57.4%。GATA6在mRNA和蛋白水平的表达明显下降。GATA6沉默的肝癌Huh-7细胞凋亡比例增加(P<0.05),NF-κB和Bcl-2蛋白水平表达降低。结论:利用慢病毒载体干扰技术沉默GATA6基因的表达可以明显促进Huh-7细胞凋亡,其机制可能通过NF-κB信号通路调节凋亡相关蛋白的表达,进而影响细胞的凋亡。靶向GATA6的RNA干扰技术在肝癌的基因治疗中具有一定的研究价值。

• 单位
  中山大学附属第一医院