以乙肝病毒核心抗原HBcAg为载体的utrophin抗体的制备

作者：潘英; 朱敏生; 傅健; 王晓春; 李越希

来源：江苏医药, 2006, (11): 1037-1039.

DOI：10.19460/j.cnki.0253-3685.2006.11.015

• Utrophin
• 抗体
• 乙肝病毒核心抗体

目的构建以乙肝病毒HBc为载体的带有utrophin的两个B细胞表位多肽的融合表达质粒pHBc-2UB,表达出融合蛋白并纯化,通过免疫新西兰大白兔获得抗utrophin的抗体。方法通过DNAstarⅡ模拟出utrophin的两个显著优势的B表位。用PCR法合成片段插入HBcAg序列的78位,将该合成片段克隆至pET28a载体中,构建重组表达质粒,表达出融合蛋白HBc-2UB,纯化后免疫新西兰白兔。再将该合成片段克隆至pGEX4T-2载体中,构建重组表达质粒,表达出融合蛋白GST-2UB,用于检测两个表位的抗体。结果测序结果表明重组质粒构建成功,SDS-PAGE电泳显示融合蛋白表达正确,ELISA检测到高滴度抗体。结论以HBc呈现utrophin的B表位被成功表达和纯化,获得高滴度的与两个B表位结合的抗体,为utrophin检测和DMD治疗药物研究打下了基础。

• 单位
  南京大学; 中国人民解放军南京军区军事医学研究所