双启动子调控的条件复制腺病毒制备及其体外抑瘤作用

作者：任继鸿; 龙敏; 温志远; 刘昕阳; 陈曦; 成诗银; 张惠中

来源：现代肿瘤医学, 2010, (05): 848-852.

• 复制腺病毒
• survivin启动子
• hTERT启动子
• 肝癌 replicating adenovirus
• survivin promoter
• hTERT promoter
• hepatoma carcinoma

目的:构建并制备survivin及hTERT双启动子调控的条件复制腺病毒,探讨其特异性溶瘤作用。方法:PCR方法分别扩增肿瘤特异性survivin及hTERT启动子,分别克隆入腺病毒载体pXC1的两个复制必需基因E1A和E1B序列上游启动子区,构建出双肿瘤特异性启动子调控的条件复制腺病毒载体pXC1-SP-TP;脂质体法与pBHGE3骨架质粒共转染293E细胞进行重组腺病毒包装,稀释法测定腺病毒滴度;应用MTT、活细胞计数等方法观察其对肝癌细胞HepG2的特异性溶瘤作用并以正常人的血管内皮细胞ECV304作为对照。结果:测序及双酶切鉴定结果证实,成功构建了双肿瘤特异性启动子调控复制腺病毒载体;...

• 单位
  中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 第四军医大学