碧萝芷对三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖和凋亡及转移影响

作者：杨春姝; 秦光远; 罗小萌; 徐竞忆; 杨娉婷; 郑新宇^*

来源：中华肿瘤防治杂志, 2022, 29(21): 1528-1535.

DOI：10.16073/j.cnki.cjcpt.2022.21.02

• 乳腺癌
• 碧萝芷
• 增殖
• 凋亡
• 转移

目的 探讨松树皮提取物碧萝芷对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖、凋亡和转移的影响及可能机制。方法 分别用30、60和90 mg/L的碧萝芷和RPMI 1640培养基(对照组)处理乳腺癌MDA-MB-231细胞，采用MTT法检测碧萝芷对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖抑制作用；克隆形成实验检测对MDA-MB-231细胞体外生长能力的影响；流式细胞仪检测细胞凋亡率；Transwell小室法分别检测各浓度碧萝芷对乳腺癌MDA-MB-231细胞迁移和侵袭能力的影响；蛋白质印迹法分别检测碧萝芷处理后，乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-9、Caspase-3、PARP以及基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9的表达；明胶酶谱法检测MMP-2和MMP-9的活性。结果 MTT结果显示，与对照组相比，碧萝芷呈剂量依赖及时间依赖性抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖，差异有统计学意义，F浓度=178.335,P浓度<0.001;F时间=3.476,P时间=0.035;二因素间交互作用：F时间×浓度=3.162,P时间×浓度=0.007,为协同作用。克隆形成实验结果显示，对照组及30、60、90 mg/L碧萝芷组克隆形成率分别为(20.09±1.96)%、(14.34±2.05)%、(12.90±1.37)%和(9.81±1.27)%,差异有统计学意义，F=57.902,P<0.001。流式细胞仪检测结果显示，对照组及30、60、90 mg/L碧萝芷组的细胞凋亡率分别为(3.58±0.26)%、(5.75±0.40)%、(9.60±0.20)%和(19.71±0.38)%,差异有统计学意义，F=4 507.561,P<0.001。Transwell小室结果显示，对照组及30、60、90 mg/L碧萝芷组的迁移细胞数目分别为41±3、36±4、22±5和9±2,差异有统计学意义，F=131.882,P<0.001;侵袭转移的细胞数目分别为30±4、27±3、17±2和10±2,差异有统计学意义，F=89.964,P<0.001。蛋白质印迹法结果显示，碧萝芷可上调Bax(F=973.558,P<0.001)、Caspase-9(F=679.196,P<0.001)、Caspase-3(F=912.678,P<0.001)和PARP(F=70.155,P<0.001)蛋白表达，下调Bcl-2(F=216.980,P<0.001)蛋白表达。同时，各组MDA-MB-231细胞中的MMP-2(F=160.844,P<0.001)及MMP-9(F=94.135,P<0.001)蛋白表达水平降低；MMP-2(F=1 363.577,P<0.001)和MMP-9(F=1 017.977,P<0.001)活性降低。结论 碧萝芷可通过促进乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡的方式抑制其生长，且能抑制细胞的迁移和转移。

• 单位
  中国医科大学附属第一医院