脊尾白虾Dnmt2启动子克隆及其转录调控分析

作者：宋崇阳; 张思勉; 李永闯; 张攀; 赖晓芳; 王攀攀; 于飞; 高焕; 阎斌伦^*

来源：海洋科学, 2022, 46(05): 95-103.

• 脊尾白虾(Exopalaemon carinicauda)
• Dnmt2
• 核心启动子
• 启动子活性
• 转录调控元件

为探明脊尾白虾(Exopalaemon carinicauda)Dnmt2(DNA methyltransf-erase2,Dnmt2)启动子对Dnmt2转录的调控作用,本研究利用染色体步移技术克隆得到脊尾白虾Dnmt2启动子,使用在线软件预测该基因启动子区域的转录调控元件及转录因子结合位点,通过构建一系列缺失表达载体,利用双荧光素酶报告基因检测技术鉴定了该基因核心启动子区,并对其启动子活性进行检测。结果表明,克隆的脊尾白虾Dnmt2启动子长度为1315 bp,转录起始位点“A”位于ATG上游236 bp,启动子区域含有多种转录因子结合位点,包括STAT3、SOX、NF-κB、E2F、GATA-1等,但缺乏CpG岛。双荧光素酶报告基因检测显示,Dnmt2核心启动子区位于–196～+81bp,对启动子区域进行活性检测发现,在该基因启动子–640～–452bp区域内可能存在促进基因表达的转录调控元件,而在–1160～–640bp区域可能存在抑制该基因表达的转录调控元件。本研究结果为进一步研究Dnmt2启动子的表达调控机制提供理论依据。

• 单位
  江苏省海洋生物技术重点实验室