阳和汤对三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231凋亡Egr1/p21信号通路的影响

作者：李康乐; 杨小蒨; 张愉; 杨硕; 朱中博; 窦建卫^*

来源：中国实验方剂学杂志, 2020, 26(08): 62-67.

DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20200424

• 三阴性乳腺癌
• MDA-MB-231细胞
• 阳和汤
• 早期生长反应基因1 (Egr1)
• 细胞周期蛋白依赖性抑制剂(p21)

目的:以早期生长反应基因1(Egr1)/细胞周期蛋白依赖性抑制剂(p21)信号通路为基础,探讨古方阳和汤含药血清对人三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231凋亡的影响。方法:制备阳和汤大鼠含药血清,体外培养三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞。设空白组,阳和汤高、中、低剂量组(23. 4,11. 7,5. 85 g·kg-1),分别干预MDA-MB-231细胞24,48,72 h,细胞增殖检测(CCK-8)法检测各组细胞增殖情况。设空白组,阳和汤高、中、低剂量组(23. 4,11. 7,5. 85 g·kg-1),干预MDA-MB-231细胞48 h,采用流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况以及细胞周期分布情况;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测各组细胞Egr1,p21 mRNA的表达情况;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组细胞Egr1,p21蛋白的表达情况。结果:阳和汤干预MDA-MB-231细胞24,48,72 h,与空白组相比,阳和汤高、中剂量组能显著抑制MDA-MB-231细胞增殖(P <0. 01)。阳和汤干预MDA-MB-231细胞48 h,与空白组相比,阳和汤高、中剂量组细胞的凋亡率明显增加(P <0. 05,P <0. 01);阳和汤高、中剂量组细胞周期G0/G1期所占比例降低,G2/M期所占比例升高(P <0. 05,P <0. 01);阳和汤高、中剂量组细胞Egr1,p21mRNA和蛋白表达均增加(P <0. 05,P <0. 01)。结论:阳和汤可激活MDA-MB-231细胞中Egr1/p21信号通路,增加Egr1,p21的表达,引起G2/M细胞周期阻滞,从而诱导MDA-MB-231细胞凋亡。

• 单位
  基础医学院; 西安交通大学; 甘肃中医药大学; 西安交通大学第二附属医院