地衣芽孢杆菌KD-1β-甘露聚糖酶定点突变提高酶活性及稳定性

作者：田庚; 高伟强; 陈晓波; 张春晓^*

来源：生物技术通报, 2021, 37(10): 100-109.

DOI：10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2021-0106

• β-甘露聚糖酶
• 地衣芽孢杆菌
• 定点突变
• 酶活性
• 稳定性

对地衣芽孢杆菌β-甘露聚糖酶进行定向突变获得酶活性和稳定性提高的酶。应用PCR方法对Bacillus licheniformis KD-1 β-甘露聚糖酶基因manBl进行基因克隆和定点突变,在枯草芽孢杆菌B.subtilis DB104中进行分泌表达,采用二硝基水杨酸(DNS)法进行酶活性测定。β-甘露聚糖酶ManBl及6个突变体最适pH 6.0,最适温度60℃,6个突变体比活力和pH 6.0-10.0 之间的pH稳定性均高于野生型,突变体ManBl(T112R/K291E)比活力是野生型的2.6倍,为(9 742±370.0)U/mg,Km值为2.67 mg/mL,70℃的半衰期为80 min;C-末端带有His标签后,ManBl和ManBl(T112R/K291E)的酶活性和热稳定性降低。β-甘露聚糖突变体ManBl(T112R/K291E)酶活性和稳定性高,适合在养殖业、食品加工和洗涤业等多种工业领域中应用。

• 单位
  河北科技大学