羊痘病毒80、81基因真核表达载体构建及鉴定

作者：葛志毅; 赵微; 程思危; 周园霞; 马欣欣; 李有文

来源：现代畜牧兽医, 2023, (11): 1-5.

• 羊痘病毒
• 真核表达载体
• 生物学分析
• 细胞表达

试验旨在探究羊痘病毒80、81基因的生物学功能。利用在线软件对80、81基因进行生物信息学分析，以此为基础通过PCR技术扩增80、81基因，与真核表达载体pCDNA3.1构建重组质粒；重组质粒转染Vero细胞，CCK-8测定重组质粒在细胞中表达蛋白的毒力。结果显示：羊痘病毒80基因蛋白以α螺旋为主，表现出亲水性，具备功能酶位点；羊痘病毒81基因蛋白以无规则卷曲为主，表现出疏水性，也具有功能酶位点。以扩增80、81基因为模板成功构建pCDNA3.1-80、pCDNA3.1-81真核表达载体，CCK-8未检测到80、81基因在细胞中表达的蛋白具有毒力。研究表明，80、81基因具有功能位点，在转染细胞中未表现出毒力。

• 单位
  塔里木大学; 新疆生产建设兵团