RNAi选择性下调大鼠心肌细胞上Gsα蛋白的体外实验

作者：田运娇; 易岂建; 米青; 刘官信; 李娅莎

来源：临床心血管病杂志, 2010, (07): 545-549.

• 心肌细胞
• Gsα蛋白
• LipofectamineTMLTX&PLUS
• RNA干扰 myocytes
• α-subunit of the Gs protein
• lipofectamineTM LTX & PLUS
• RNA interference

目的:用RNA干扰技术(RNA interference,RNAi)选择性下调大鼠心肌细胞上乌苷酸结合蛋白(Gs)α亚基(Gs protein alphala subunit,Gsα)的表达,筛选出抑制Gsα蛋白效果最明显的特异短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)表达质粒。方法:构建3条靶向gnas基因的特异与RNA质粒载体(shRNA1-3),以含非特异性shRNA编码序列的质粒载体为阴性对照(HK),用脂质体LipofectamineTMLTX&PLUS转染原代培养的大鼠心肌细胞,并设空白对照组,转染后通过半定量RT-PCR和Western blot法检测Gsαm...

• 单位
  重庆医科大学附属儿童医院