人pcDNA3.1(+)-Cav-1真核表达载体的构建及鉴定

作者：文秋元; 朱德茂; 袁松英; 任彩萍; 王磊

来源：中国现代医学杂志, 2012, 22(06): 7-10.

DOI：10.3969/j.issn.1005-8982.2012.06.002

• 鼻咽癌
• caveolin-1(Cav-1)
• 转移
• 真核表达载体
• 转染 nasopharyngeal carcinoma
• caveolin-1(Cav-1)
• metastasis
• eukaryotic expression vector
• transfer

目的构建pcDNA3.1(+)-Cav-1真核表达载体,建立稳定转染pcCav-1的6-10B细胞系(6-10B-Cav-1)。方法提取5-8F细胞总RNA,利用RT-PCR获取caveolin-1(Cav-1)开放读码框(Openreading frame,ORF)序列构建Cav-1/TA亚克隆载体,再将双酶切后的目的片段连入pcDNA3.1(+)真核表达载体并转染6-10B细胞。结果 RT-PCR扩增Cav-1基因ORF序列在783 bp附近见目的条带;质粒酶切鉴定及菌落PCR鉴定分别在783 bp及346 bp附近见目的条带;转染6-10B细胞后,转染组与对照组相比,Cav-1在mRNA...

• 单位
  湖南省脑科医院; 中南大学