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摘要
【目的】研究尼罗罗非鱼CD209v-1基因的分子结构、组织表达模式及其生物学功能，为进一步揭示CD209v-1在鱼类细菌性疾病中的免疫功能提供理论依据。【方法】根据NCBI已公布的OnCD209v-1基因序列设计引物，采用PCR扩增CD209v-1基因ORF片段，并进行生物信息学分析；采用实时荧光定量PCR检测CD209v-1基因在尼罗罗非鱼各组织表达模式；随后克隆尼罗罗非鱼CD209v-1胞外段基因，构建pET-OnCD209v-1重组原核表达质粒，研究尼罗罗非鱼CD209v-1胞外段蛋白在体外对多种水生动物致病菌功能。【结果】OnCD209v-1基因ORF片段长度为780 bp，共编码259个氨基酸，推测该蛋白胞外段具有一个C 型凝集素结构域；多重氨基酸序列比对及系统进化树分析表明，OnCD209v-1相对保守，与彩虹鲷（Simochromis diagramma）聚为一支，亲缘关系最近；实时荧光定量PCR结果显示，OnCD209v-1基因在所检测组织中均有表达，且在肝脏和肠道中的表达量较高；细菌结合试验结果表明，OnCD209v-1胞外段蛋白可与多种致病菌结合；随后细菌凝集试验结果显示，该蛋白的凝集活性具有Ca2+依赖性。【结论】罗非鱼CD209v-1是一种重要的免疫分子，通过与细菌的结合作用来影响罗非鱼的免疫应答过程，进一步揭示CD209v-1在鱼类细菌性疾病中的免疫调节机制提供了理论依据。
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