摘要
目的观察2,4-二氯苯氧乙酸对斑马鱼胚胎的急性毒性和造血干细胞发育的影响。方法野生型斑马鱼胚胎暴露于2,4-D水溶液中,RT-PCR测定2,4-D暴露后斑马鱼胚胎cmyb基因表达水平,cmyb探针原位杂交和cmyb:e GFP转基因鱼系观察2,4-D暴露后斑马鱼胚胎造血干细胞的发育水平。结果急性毒性试验显示,5、10 mg/L 2,4-D组胚胎的死亡率随着暴露时间延长,胚胎死亡率维持在8%,而20 mg/L 2,4-D组胚胎的死亡率随着暴露时间延长,胚胎死亡率逐渐上升,至96 h时胚胎全部死亡。受精后48、72 h暴露组胚胎孵化率随着暴露浓度增加而减少,并呈现一定的剂量效应关系,受精72 h的LC50为16. 3 mg/L,95%的可信区间为(13. 2 mg/L,21. 3 mg/L)。与对照组相比,受精后48 h 10 mg/L 2,4-D组(t=13. 11,P<0. 001)和受精后72 h 10 mg/L 2,4-D (t=7. 176,P<0. 001)组胚胎造血干细胞数量减少,受精后48 h 10 mg/L 2,4-D组胚胎的造血干细胞标记基因cmyb(t=28. 98,P<0. 001)和原始红系祖细胞标记性基因gata1(t=13. 60,P<0. 001)表达量明显降低。结论 2,4-D可能通过影响cmyb基因的表达导致斑马鱼胚胎造血干细胞发育毒性。