高同型半胱氨酸通过抑制SETDB1促进肝脂肪沉积

作者：宋美琦; 于源慧; 张祎; 张冰; 杨天竹; 郝佳欣; 范铭坚; 王志刚^*

来源：哈尔滨医科大学学报, 2023, 57(05): 469-474.

DOI：10.20010/j.issn.1000-1905.2023.05.0469

• SET结构域分支型1
• 同型半胱氨酸
• 脂肪沉积

目的 研究同型半胱氨酸(homocysteine, Hcy)和SET结构域分支型1(SET domain bifurcated 1,SETDB1)在肝脏脂肪沉积中的作用和分子机制。方法 选取C57BL/6N雄性小鼠共14只。依据经典的Lieber-De Carli方法和高甲硫氨酸饮食(high methionine diet, HMD)建立酒精性肝病(alcoholic liver disease, ALD)和高同型半胱氨酸血症(hyperhomocysteinemia, HHcy)模型，将6只雄鼠随机分为对照组(pair fed, PF组)和酒精组(alcohol fed, AF组),每组3只，持续喂养5周，分别给予对照饲料和酒精液体饲料建立ALD模型；将8只雄性小鼠随机分为对照饲料饮食组(Chow组)与高甲硫氨酸饮食组(HMD组),每组4只，持续喂养5周建立HHcy模型。在AML12细胞中分别加入3.33μmol/L油酸(oleic acid, OA)、100μmol/L同型半胱氨酸(homocysteine, Hcy),将OA与Hcy共同培养48 h, SETDB1 siRNA干扰AML12细胞6 h后培养至48 h。应用甘油三酯(triglyceride, TG)检测试剂盒和Hcy ELISA检测肝脏、血浆和细胞中TG和Hcy水平，使用qRT-PCR和Western blot检测肝脏及细胞SETDB1 mRNA、蛋白水平及其活性，提取细胞总RNA进行RNA表达芯片分析并富集功能通路。结果 ALD小鼠模型出现肝脏脂肪沉积，AF组与PF组比较，血浆和肝脏Hcy水平增高，肝脏SETDB1表达和活性降低(P<0.05)。HMD中出现肝脏脂肪沉积，HMD组与Chow组比较，血浆和肝脏Hcy水平上升，肝脏SETDB1表达和活性降低(P<0.05)。外源Hcy导致AML12细胞SETDB1表达和活性下降，同时细胞内TG含量增加(P<0.05)。敲低SETDB1导致AML12细胞TG含量增加(P<0.05)。结论 同型半胱氨酸通过抑制肝脏SETDB1表达和活性促进肝脏脂肪沉积。

• 单位
  广州医科大学; 哈尔滨医科大学附属第五医院; 生物化学教研室; 哈尔滨医科大学大庆校区