摘要
利用酶固定化技术,以甘油激酶(GK)、甘油-3-磷酸氧化酶(GPO)为反应酶,研究GK、GPO的固定化方法及固定化模式,制备甘油酶膜、甘油酶电极,并利用其测定甘油含量。结果表明,GK、GPO按1∶1比例固定化时,酶电极电流信号最高;最高效固定模式为:GK固定于核微孔膜,共价偶联GPO固定于Biodyne膜,形成共价双酶膜,进而组装为甘油酶电极。性能研究表明,甘油酶电极最适pH值为7.0,最佳温度为2832℃;最佳实验条件下,线性范围为0.059.00 g/L;回收率为98.4%102.4%,稳定性高,相对标准偏差(RSD)<5%;测定结果与高效液相色谱法、高碘酸氧化法比较,无明显差异(P>0.05),且该方法操作简单,专一性强,检测快速,适于实际生产中甘油的实时定量及监控。
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单位齐鲁工业大学; 山东省科学院生物研究所