人血浆脂联素分离纯化及活性鉴定

作者：廉坤; 王海昌; 王汝涛; 靳温; 孙璐; 马新亮; 陶凌

来源：心脏杂志, 2011, (02): 209-213.

DOI：10.13191/j.chj.2011.02.75.liank.002

• 脂联素
• 分离纯化
• 活性鉴定 adiponectin
• isolation
• purification
• bioactivity

目的:从人血浆中分离纯化各亚型脂联素(APN),建立人血浆APN活性的检测方法,同时获得制备抗APN各亚型特异性抗体所需的抗原。方法:将-80℃保存的人血浆融解后稀释,采用硫酸铵沉淀、阴离子交换层析和凝胶过滤层析分离纯化人血浆中不同亚型的APN。用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、免疫印迹(Western blot)和ELISA检测纯化的产物及回收率。通过孵育人脐静脉内皮细胞后,检测磷酸腺苷激活的蛋白激酶(AMPK)的水平反映APN的活性。结果:所获不同亚型的APN均具有生物学活性,高聚体APN激活AMPK的能力最强。APN活性回收率为40%。结论:建立了一种能够快速、简...

• 单位
  第四军医大学; 西京医院