粪产碱杆菌青霉素G酰化酶的分离纯化及酶学性质

作者：李震; 储炬; 庄英萍; 张嗣良; 袁中一

来源：华东理工大学学报, 2008, (02): 178-183+188.

DOI：10.14135/j.cnki.1006-3080.2008.02.005

• 粪产碱杆菌
• 青霉素G酰化酶
• 阴离子交换层析
• 疏水层析
• 分离纯化 Alcaligenes faecalis
• penicillin G acylase
• anion-exchange chromatography
• hydrophobic chromatograph
• purification

采用DEAE-Sepharose阴离子交换层析和Butyl-Sepharose CL 4B疏水层析,从重组大肠杆菌DH5α菌体中分离纯化得到粪产碱杆菌青霉素G酰化酶(AfPGA)。经纯化,AfPGA纯度较粗酶提高50.6倍、比活达到212.7 U/mg,经HPLC测定纯度为92.8%,收率为78%。理化性质分析表明:AfPGA含有2个亚基(α亚基和β亚基,其Mw分别为2.90×104和5.92×104;AfP-GA等电点约为7.9~8.0,最适pH约为10.0,并在pH>7.0时表现出了稳定的催化活力。

• 单位
  华东理工大学; 生物反应器工程国家重点实验室