基于CRISPR-Cas12a和血糖仪的便携式定量检测三聚氰胺

作者：史铠; 孙**; 周雨芹; 宋九华; 成英; 尹会; 贺范祥; 周媛媛; 李娜; 舒琴; 陈稼轩

来源：分析试验室, 2023, 1-10.

DOI：10.13595/j.cnki.issn1000-0720.2022.070606

• CRISPR-Cas12a
• 便携式血糖仪
• 三聚氰胺

CRISPR-Cas系统作为下一代分子诊断技术在生物传感领域具有很强的应用前景。基于CRISPR-Cas12a的附属切割活性与血糖仪（PGM），构建了便携式PGM-CRISPR生物传感器，实现对三聚氰胺的定量、灵敏及特异性检测。靶标三聚氰胺与双链DNA探针中的核酸适配体特异性结合，并将另一条DNA释放出来。释放出来的DNA可以激活CRISPR-Cas12a的附属切割活性。激活后的CRISPR-Cas12a进一步切割电极上蔗糖酶修饰的单链DNA探针，将蔗糖酶修饰的DNA短片段释放到溶液中。溶液中的蔗糖酶催化蔗糖生成葡萄糖，从而产生可读取的PGM信号。在最优条件下，PGM响应信号与0.1 ～25 μmol/L范围内的三聚氰胺浓度呈良好的线性关系，检出限为37 nmol/L。该便携式PGM-CRISPR生物传感器具有很强的特异性，能够用于牛奶样品中三聚氰胺的定量检测。

• 单位
  阿坝师范学院; 乐山师范学院