摘要
目的研究脂肪间充质干细胞(ADSCs)血管内皮生长因子(VEGF)基因沉默后对人MKN45胃癌细胞系体内生长的影响。方法采用siRNA技术沉默脂肪间充质干细胞(ADSCs)内VEGF基因。体外成功构建针对VEGF的siRNA表达载体和1个阴性对照,分为VEGF siRNA组、阴性对照组、空白对照组。Lipofectamine2000介导转染ADSCs,RT-PCR检测显示与阴性对照组、空白对照组相比,VEGF siRNA组ADSCs中VEGF表达显著降低,将上述3组处理后的ADSCs与MKN45胃癌细胞混合后接种裸鼠皮下,观察胃癌生长情况;通过CD34免疫组织化学法染色检测胃癌组织血管生成情况。结果阴性对照组和空白对照组的ADSCs在裸鼠体内可显著促进MKN45胃癌细胞的生长(P<0. 05),VEGF siRNA组ADSCs在裸鼠体内对MKN45胃癌细胞的生长无促进作用(P>0. 05);胃癌组织平均血管密度(MVD)结果为,阴性对照组和空白对照组分别为(10. 9±0. 64)个/视野及(10. 7±0. 50)个/视野,VEGF siRNA组为(5. 3±0. 36)个/视野,单纯MKN45组为(5. 1±0. 52)个/视野。VEGF siRNA组明显低于阴性对照组和空白对照组(P<0. 05),与单纯MKN45组无明显差异(P>0. 05)。结论 ADSCs内VEGF基因沉默后VEGF明显降低,与MKN45胃癌细胞混合后接种对胃癌组织血管形成和胃癌生长无影响。
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单位河北大学附属医院