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摘要
【目的】揭示松材线虫（Bursaphelenchus xylophilus）性别分化基因Bx-sex-1的表达特征和生物学功能。【方法】通过MEGA 6中的Jones-Taylor-Thornton (JTT)模型，采用邻接法(neighbor joining，NJ)方法对Bx-sex-1和其他线虫的氨基酸序列进行系统发育构建。采用同步培养的方法分别收集不同龄期的松材线虫并提取总RNA，反转录获得cDNA并采用实时荧光定量PCR (qRT-PCR) 的方法，研究Bx-sex-1在松材线虫不同发育阶段的相对表达量。同时采用qRT-PCR并通过绝对定量分析Bx-sex-1基因在雌虫和雄虫基因组的拷贝数。采用dsRNA浸泡法对目的基因进行干扰，观察松材线虫后代卵的孵化率和雌雄比的变化。【结果】系统进化树显示松材线虫Bx-sex-1和其他2个植物寄生线虫成为一支，与自由生线虫和寄生动物线虫分别进化为不同的分支。松材线虫Bx-sex-1在不同发育阶段相对表达量有差异，在卵时相对表达量最高，而在2龄幼虫时期最低，从2龄幼虫时期到成虫时期相对表达量逐渐升高。qRT-PCR结果显示Bx-sex-1基因在雌虫和雄虫基因组中均为单拷贝。Bx-sex-1被干扰后，卵的孵化率下降，雌雄比降低。【结论】松材线虫Bx-sex-1基因在卵的发育过程和性别分化中可能具有重要作用。
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