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摘要
目的旨在研究来源于抗病毒基因HERC5的新型环状RNA hsacirc0001426的特征,并探索该环状RNA真核过表达载体的构建和鉴定。方法从反向剪切位点的验证、蛋白翻译的潜能、对RNase R处理的抵抗性、在细胞内的胞质胞核分布情况四个方面来研究hsacirc0001426的特征。此外,还利用环状RNA克隆构建试剂盒来构建hsacirc0001426的过表达载体,并验证其表达效果。结果 hsacirc0001426是由HERC5基因第18号外显子反向剪切至第12号外显子形成,其序列中包含一条可翻译318个氨基酸的开放阅读框,其抵抗Rnase R的处理,主要分布于细胞质。针对该环状RNA的过表达载体构建成功,其在转染HEK293T细胞后48 h的表达量最高。结论首次成功分析了抗病毒基因HERC5的新型环状RNA hsacirc0001426的特征,并利用试剂盒首次成功构建了hsacirc0001426的真核过表达载体,并可在细胞中高效表达;为深入研究hsacirc0001426的特征和功能奠定基础,并进一步扩充了HERC5基因的相关研究。
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