干扰素λ对氧糖剥夺/复氧诱导的血-脑屏障模型通透性的影响

作者：孙明; 米执中; 高婷; 王勇; 唐洗敏; 李莹莹^*

来源：中国神经免疫学和神经病学杂志, 2022, 29(03): 205-215.

• 干抗素类
• 氧糖剥夺
• 复氧
• 血脑屏障
• 紧密连接蛋白
• 卒中

目的 探究干扰素-lambda(interferon-lambda, IFN-λ)对氧糖剥夺/复氧(oxygen glucose deprivation/reoxygenation, OGD/R)诱导的血脑屏障(blood brain barrier, BBB)模型通透性的影响及机制。方法 通过Transwell共培养模型，将b.End3细胞在Transwell的上腔室培养，星形胶质细胞在下腔室培养，构建BBB模型。将BBB模型分为对照组、OGD/R处理组、IFN-λ干预组，每组设3个复孔。OGD/R处理组给予OGD/R处理，IFN-λ干预组在给予OGD/R处理的基础上给予IFN-λ干预。采用qRT-PCR检测IFN-λ在OGD/R模型中是否发挥作用；通过qRT-PCR实验确定构成Transwell共培养模型的星形胶质细胞和脑微血管内皮细胞(b.End3)能否表达IFN-λ的受体；根据Transwell渗透性实验FITC-dextran-10000渗透情况，评估IFN-λ处理后对OGD/R模型BBB通透性的影响；通过qRT-PCR、Western blot和荧光共聚焦实验检测b.End3细胞紧密连接蛋白ZO-1、Occludin和Claudin-5 mRNA及蛋白表达水平。结果 qRT-PCR检测结果显示，与对照组相比，OGD/R处理组星形胶质细胞和b.End3细胞IFN-λ2和IFN-λ3表达增加(P<0.05),对照组和OGD/R处理组间星形胶质细胞和b.End3细胞IFNLR1和IL-10Rβ表达水平无统计学差异(P>0.05);Transwell渗透性实验结果显示，与OGD/R处理组相比，IFN-λ干预组FITC-dextran-10000渗透量明显降低(P<0.05);qRT-PCR检测结果显示，与OGD/R处理组相比，IFN-λ干预组b.End3细胞紧密连接蛋白mRNA表达增加(P<0.05);Western blot检测结果显示，与OGD/R处理组相比，IFN-λ干预组b.End3细胞紧密连接蛋白表达增加(P<0.05);免疫荧光共聚焦检测结果显示，IFN-λ干预组b.End3细胞紧密连接蛋白平均荧光强度高于OGD/R处理组(P<0.05)。结论 IFN-λ能够促进紧密蛋白表达和连接性，降低OGD/R诱导的BBB的通透性。

• 单位
  大理大学; 基础医学院