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摘要
本研究旨在建立一种检测猪嵴病毒(PKV)抗体的间接ELISA检测方法。通过原核表达系统表达PKV VP0基因作为包被抗原，并通过Western blot鉴定证明重组蛋白与PKV阳性血清能发生良好的特异性反应。优化反应条件，得出PKV VP0间接ELISA检测方法最适反应条件是抗原包被浓度为0.62μg/mL，血清稀释浓度为1∶200，最佳酶标二抗稀释浓度1∶5000，使用5%脱脂奶粉作为封闭液37℃孵育1 h，显色10 min，当检测样品OD450<0.225判定血清样品抗体为阴性，OD450≥0.225判定血清样品抗体为阳性，且特异性高、重复性好，与Western blot符合率达到95.6%。PKV VP0蛋白间接ELISA方法的建立，作为一种操作简单，灵敏度高，特异性高，重复性好的血清学检测方法，为PKV的监测和预防提供了技术支持。
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