鸭腺病毒3型荧光RPA恒温快速检测方法的建立与应用

作者：刘孟啸; 蔡姝; 刘建钗; 赵中伟; 孙宁; 曲光刚^*; 苗立中^*

来源：中国兽药杂志, 2023, 57(11): 8-15.

• DAdV-3
• Hexon基因
• RPA
• 恒温快速检测

鸭腺病毒3型(Duck adenovirus type 3,DAdV-3)是我国近年来新发的禽腺病毒，致病力较强，已经严重影响到鸭养殖业。为实现对DAdV-3的快速检测，以DAdV-3的Hexon基因为靶基因，设计特异性重组酶聚合酶扩增(Recombinase polymerase amplification, RPA)引物和探针，并构建重组标准质粒命名为DAdV-H-18T,优化RPA反应条件后，建立DAdV-3的荧光RPA恒温快速检测方法。结果显示，该检测方法最佳反应条件为38℃、18 min;特异性强，与其他常见鸭病病原如鸭肝炎病毒、鸭坦不苏病毒等均无交叉反应。对重组质粒DAdV-H-18T的最低检测限为1 copy/μL;采用建立的RPA检测方法和qPCR对55份鸭组织临床样本进行检测，阳性率分别为65.4%、50.9%,检测符合率为92.7%。研究建立的DAdV-3荧光RPA方法，检测速度快，敏感性高，特异性强，为该病临床快速检测提供了有力工具。

• 单位
  河北工程大学; 山东省滨州畜牧兽医研究院; 生命科学与食品工程学院; 华中农业大学