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摘要
目的:表达风疹病毒(RV)E1特异肽段的重组融合蛋白。方法:经过双酶切鉴定和测序鉴定的阳性重组质粒载体pGEX-2T/E1-N,转化到感受态大肠杆菌BL21后,用异丙基-β-D硫代半乳糖苷(IPTG)诱导其表达,并对诱导条件进行优化。用谷胱甘肽琼脂糖珠纯化重组融合蛋白,SDS-PAGE鉴定。结果:用IPTG可以诱导E1特异肽段的重组融合蛋白表达,37℃诱导时,最佳诱导剂浓度为1mmol/L,最佳诱导时间为4h。诱导温度从37℃降至16℃时,重组融合蛋白以可溶性形式表达,用谷胱甘肽琼脂糖珠纯化获得了纯化的重组融合蛋白。结论:利用原核表达系统可以获得纯化的风疹病毒E1特异肽段的重组融合蛋白。
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单位南京医科大学; 武警江苏总队医院
