PHLD融合蛋白在毕赤酵母中的构建和表达

作者：张新国; 郭广君; 李坤; 孙巧云; 郭思佳; 马小弟; 马国艳

来源：生命科学研究, 2018, 22(06): 475-482.

DOI：10.16605/j.cnki.1007-7847.2018.06.007

• δ-睡眠肽(DSIP)
• 人血清白蛋白(HSA)
• 连接肽
• 蛋白质转导结构域(PTD)
• 毕赤酵母
• 融合蛋白

δ-睡眠肽(delta sleep inducing peptide, DSIP)的相对分子质量较小,在体内半衰期较短,因此本研究将蛋白质转导结构域(protein transduction domain, PTD)、人血清白蛋白(human serum albumin, HSA)、连接肽(linker)以及δ-睡眠肽(DSIP)进行融合表达,以获得重组PHLD睡眠肽融合蛋白。研究以pPIC9K/HSA为模板,利用PCR技术进行扩增,将获得的PHLD基因连接到表达载体pPIC9K上,然后转入组氨酸缺陷型毕赤酵母GS115,经G418筛选获得了高表达PHLD融合蛋白的酵母工程菌株,并进一步获得了高纯度的融合蛋白。本研究将为DSIP的深入研究和应用提供技术资料。

• 单位
  兰州理工大学