Fast COLD-PCR/Sanger测序法对乙型肝炎患者不同耐药基因突变类型检测的应用研究

作者：叶扬; 吕蕙伶; 王先化

来源：世界最新医学信息文摘, 2017, 17(49): 3-5.

• 乙型肝炎
• 基因突变
• 类型检测

(1)Fast COLD-PCR/Sanger测序法对不同突变类型的检测浓度有所不同,对突变株DNA的最低检出限可从5.0 E+01 IU/m L-1.0 E+03 IU/m L不等;Full COLD-PCR/Sanger测序法对单一突变类型的检测浓度大致相同,突变DNA浓度约≥5.0 E+02 IU/m L时即可检出,对混合突变类型时最低检出限可提高至1.0 E+02 IU/m L。(2)常规PCR/Sanger测序对所有类型突变株的检出灵敏度均为10%(突变型:野生型比例为1:10,下同)。对于单一位点的突变类型,当发生熔解温度(melting temperature,Tm)下降的突变(如C:G→T:A等)时,Fast COLD-PCR对突变株的检出灵敏度达1%,Full COLD-PCR则为2%;对Tm不变或升高的突变(如C:G→G:C或T:A→C:G等),仅有Full COLD-PCR可提高对突变株的灵敏度为2%。对于多位点突变类型,Fast COLD-PCR与Full COLD-PCR法检出突变的灵敏度可进一步提高为0.5%和1%。