低氧和IL-1β联合刺激对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞基质金属蛋白酶表达的影响及机制研究

作者：蒋琼; 姚瑞峰; 伍启阳; 王国芬; 王俊松; 罗心静^*

来源：浙江医学, 2023, 45(16): 1681-1793.

• 滑膜细胞
• 低氧
• 缺氧诱导因子
• 基质金属蛋白酶

目的 探讨低氧和IL-1β联合刺激对类风湿关节炎（RA）成纤维样滑膜细胞（FLS）基质金属蛋白酶（MMP）-1、MMP-3、MMP-9水平的影响，并分析缺氧诱导因子1α(HIF-1α)通路和NF-κB通路在其中的调控作用。方法 应用组织块法从临床RA患者滑膜组织分离原代FLS，一阶段实验中，细胞分为常氧组、低氧组、IL-1β组、IL-1β+低氧组；二阶段实验中，细胞分为IL-1β+低氧组、YC组、BAY组、YC+BAY组。采用ELISA法和Real-time PCR法分别检测MMP-1、MMP-3、MMP-9水平及MMP-1、MMP-3、MMP-9 mRNA表达水平，采用Western blot法检测HIF-1α和磷酸化NF-κB p65(p-p65)的表达，采用免疫荧光法检测p-p65的表达及核移位。结果 与常氧组比较，IL-1β组MMP-1、MMP-3、MMP-9水平均升高（均P<0.05）；而与IL-1β组比较，IL-1β+低氧组MMP-1、MMP-3、MMP-9水平均升高（均P<0.05）。与常氧组比较，低氧组、IL-1β组MMP-1、MMP-3、MMP-9 mRNA表达水平均升高（均P<0.05）；而与IL-1β组、低氧组比较，IL-1β和IL-1β+低氧组MMP-1、MMP-3、MMP-9水平均升高（均P<0.05）。与常氧组比较，低氧组、IL-1β组HIF-1α和p-p65核移位明显增加，而IL-1β+低氧组HIF-1α和pp65蛋白表达水平及核移位进一步增加。YC或BAY预处理细胞后，IL-1β+低氧组MMP-1、MMP-3、MMP-9水平和mRNA表达水平均下降（均P<0.05）。结论 低氧和IL-1β能协同促进RA关节滑膜组织中FLS生成MMP，而HIF-1α和NF-κB通路在RA炎症缺氧微环境病变机制中起重要作用。

• 单位
  台州学院; 台州市立医院