应用SEC-UV-MALS-RI技术分析重组腺相关病毒(rAAV)的颗粒滴度和实心率

作者：李响; 史新昌; 王恒; 韩春梅; 秦玺^*; 周勇^*

来源：药物分析杂志, 2023, 43(11): 1840-1846.

DOI：10.16155/j.0254-1793.2023.11.05

• 分子排阻色谱
• 多角度激光散射
• 重组腺相关病毒
• 滴度
• 实心率
• 聚体含量

目的:建立分子排阻色谱(SEC)串联紫外检测器(UV)、多角度激光散射检测器(MALS)和示差检测器(RI)的方法分析重组腺相关病毒(rAAV)的颗粒滴度和实心率。方法:对rAAV、rAAV空壳对照品和二者混合样品进行SEC-UV-MALS-RI串联分析，流动相为50 mmol·L-1磷酸盐缓冲液，流速为0.3 mL·min-1,进样量为50μL,温度为室温，采集时间为30 min;紫外检测器选择260 nm和280 nm双通道；18角度激光散射检测和示差检测采用系统默认设置；用WYATT软件分析结果。结果:样品颗粒滴度为4.816×1012 vp·mL-1,RSD为0.37%;空壳对照品颗粒滴度为3.199×1012 vp·mL-1,RSD为0.75%。按不同预设比例混合的5份样品颗粒滴度的RSD均在3%以内，实心率RSD均在4%以内。混合样品的颗粒滴度和实心率测定结果与预期值基本一致。结论:采用SEC-UV-MALS-RI方法可以分析rAAV制品的颗粒滴度、实心率等项目，适用于rAAV制品颗粒滴度和实心率的质量控制。

• 单位
  中国食品药品检定研究院