三叶青黄酮对食管鳞状细胞癌细胞迁移、侵袭及自噬的影响

作者：殷晓庆; 涂铭书; 庄婉珍; 夏雨; 张毅; 黄毅^*

来源：福建中医药, 2023, 54(04): 17-32.

DOI：10.13260/j.cnki.jfjtcm.2023.04006

• 三叶青黄酮
• 自噬
• 细胞迁移侵袭
• LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ
• p62

目的 探讨三叶青黄酮对食管鳞状细胞癌（ESCC）细胞迁移、侵袭及自噬的影响。方法 取对数生长期的人ESCC细胞株KYSE150细胞（以下简称KYSE150细胞）分为0μg/mL组、25μg/mL组、50μg/mL组、75μg/mL组，采用CCK-8法检测三叶青黄酮溶液干预0、24、48 h后各组细胞活力并计算干预48 h的半抑制浓度（IC50），筛选出三叶青黄酮溶液最佳干预浓度为50μg/mL。取对数生长期的KYSE150细胞分为0μg/mL组、50μg/mL组，采用Transwell小室法检测三叶青黄酮溶液干预48 h后2组细胞迁移、侵袭能力，Western blot检测上皮细胞-间充质转化（EMT）相关蛋白N-cadherin、Snail、Slug蛋白表达量。取对数生长期的KYSE150细胞分为空白组、氯喹组、三叶青黄酮组、三叶青黄酮+氯喹组，空白组不使用药物干预，氯喹组加入10μmol/L氯喹，三叶青黄酮组加入50μg/mL三叶青黄酮溶液，三叶青黄酮+氯喹组加入10μmol/L氯喹与50μg/mL三叶青黄酮溶液干预，均干预48 h后采用Western blot检测自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、p62蛋白表达量。结果 与0μg/mL组比较，各药物组随着三叶青黄酮溶液浓度的增加，KYSE150细胞活力均逐渐下降（P均<0.05）；与0μg/mL组比较，50μg/mL组KYSE150细胞迁移和侵袭数量，N-cadherin、Snail、Slug蛋白表达量均降低（P均<0.05）；与空白组比较，氯喹组、三叶青黄酮组及三叶青黄酮+氯喹组KYSE150细胞LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、p62蛋白表达量均显著增高（P均<0.05）；与氯喹组比较，三叶青黄酮+氯喹组KYSE150细胞LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、p62蛋白表达量增高更显著（P<0.05）。结论 三叶青黄酮可下调N-cadherin、Snail、Slug蛋白表达量以抑制ESCC细胞的迁移和侵袭能力，上调LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ与p62的表达诱导自噬体的产生，从而抑制细胞自噬流，发挥对ESCC细胞活力的抑制作用。

• 单位
  福建省立医院; 福建中医药大学