结核分枝杆菌通用检测方法的建立及应用

作者：孙菲; 贺理; 戴佩希; 万向阳; 李丹; 唐连飞

来源：中国国境卫生检疫杂志, 2017, 40(02): 87-90.

DOI：10.16408/j.1004-9770.2017.02.003

• 结核分枝杆菌
• 细胞色素氧化酶
• 荧光定量PCR

目的建立一种快速检测结核分枝杆菌的方法,并探讨其临床应用价值。方法以结核分枝杆菌细胞色素氧化酶(CYP141)基因为靶点设计多对引物和探针,用BLAST软件分析其特异性,优化PCR反应条件,用国家标准品(阴性参考品15份、阳性参考品15份、最低检出量参考品4份及重复参考品10份)和124份经培养鉴定的临床样本(结核分枝杆菌阳性75份)验证方法的可靠性和临床应用价值。结果国家阴性和阳性参考品的符合率均为100%,最低检出量参考品为不高于1×102cfu/ml;10份重复参考品均呈阳性,对临床样本检测的灵敏性和特异性分别为96.00%、97.96%,总符合率为96.77%,一致性好(Kappa值=0.933;χ2=104.21,P<0.001)。结论建立了结核分枝杆菌通用型核酸检测方法,适用于卫生检疫系统和临床实验室应用。

• 单位
  中南大学湘雅医学院; 河南中医药大学; 湖南出入境检验检疫局; 湖南国际旅行卫生保健中心