抑制plk1表达导致胃癌细胞cyclinB／cdc2复合体活性升高

作者：兰斌; 刘炳亚; 陈雪华; 瞿颖; 张晓青; 蔡劬; 朱正纲

来源：医学分子生物学杂志, 2005, (04): 254-258.

• 胃肿瘤
• polo样激酶基因1
• 小片断干扰RNA
• cyclinB／cdc2复合体
• 细胞周期
• 有丝分裂

目的观察抑制polo样激酶基因1(plkl)表达对胃癌细胞株MKN45的cyclinB／cde2复合体(MPF)及细胞周期的影响。方法化学合成小片断干扰RNA(siRNA)阻断MKN45细胞plkl基因的表达；实时定量PCR及Western印迹检测干扰前后plkl mRNA及蛋白质表达的变化；倒置显微镜观察细胞形态的变化；流式细胞仪检测MKN45细胞周期分布的变化；Western印迹检测cyclinB与cdc2表达水平的变化,激酶活性分析检测cdc2激酶活性变化。结果经靶向plkl的siRNA作用后,plkl siRNA mRNA及蛋白质表达明显下降；较多MKN45细胞变圆及呈现G_2期细胞DNA含量(P<0．05)；cyclinB平均表达水平在48及72h,较对照siRNA组升高了82．38％和32．89％(P<0．05),cdc2表达水平无明显变化,但其平均活性在48及72h较对照siRNA组升高了29．34％和80．33％(P<0．05)。结论 PLKl与其下游的cyclinB／cdc2复合体活性之间在MKN45细胞有丝分裂的前后期可能存在着不同的调控机制,PLKl在MKN45细胞有丝分裂的启动及退出方面均发挥关键作用。

• 单位
  福建医科大学附属第一医院