摘要
为探讨南蛇藤提取物联合miR-451抑制人胃癌AGS细胞侵袭和迁移的作用机制,用慢病毒转染技术构建稳定过表达miR-451的人胃癌AGS细胞,记作AGS/miR-451+细胞。MTT试验检测不同浓度南蛇藤提取物(20、40、80、160或320μg·mL-1)对AGS/miR-451+细胞增殖的影响。伤口愈合试验和Transwell试验观察南蛇藤提取物对细胞迁移的影响。qRT-PCR试验检测南蛇藤提取物处理后细胞内mTOR mRNA表达量的变化。Western blot试验分析南蛇藤提取物对上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transformation, EMT)和PI3K/AKT/mTOR信号转导通路相关蛋白质表达的影响。结果表明:南蛇藤提取物处理24 h后明显抑制AGS/miR-451+细胞的侵袭和迁移能力。细胞中E-Cadherin表达量增加,Vimentin和N-cadherin表达量降低。mTOR通路相关蛋白质,如mTOR、PI3K、AKT、4EBP1的总蛋白质表达水平和磷酸化蛋白质表达水平均显著降低。综上,南蛇藤提取物协同miR-451可抑制AGS/miR-451+细胞的增殖、侵袭和迁移,其分子机制与PI3K/AKT/mTOR信号转导通路相关。
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单位扬州市妇幼保健院; 扬州大学