摘要
目的观察绿茶提取物巾的主要活性成分没食子儿茶素没食子酸脂(EGCG)对经多次长、中波紫外线(UVA、UVB)照射后人皮肤成纤维细胞(HSF)光老化及突变情况的影响。方法分离并培养新生儿包皮 HSF,将其分为正常对照组、EGCG 干预组、UVA 组、UVA+EGCG 组、UVB 组、UVB+EGCG 组;UVB 照射剂量为30 mJ/cm~2,UVA 照射剂量为10 J/cm~2,每天照射 HSF 共持续2周。预实验选定 EGCG 浓度25μg/ml。采用组织化学染色法检测细胞中衰老相关β-半乳糖苷酶的表达量,观察细胞老化情况;采用克隆法检测次黄嘌呤磷酸核糖转移酶(HPRT)基因位点突变频率,观察紫外线照射的致突变力以及加入 EGCG 干预后的情况。结果 (1)正常对照组及 EGCG 组均只见少量的β-半乳糖苷酶阳性细胞。其他几组阳性细胞比率为 UVB 组:43%±4%;UVA 组:54%±4%;EGCG+UVB 组:64%±5%;EGCG+UVA 组:75%±5%,4组细胞间阳性比率差异有统计学意义(P<0.05)。(2)正常对照组与 EGCG 处理组的 HPRT 自发突变率很低。单纯 UVB 及 UVA 照射诱导的突变分别是自发突变的72倍及241倍,而 UVB+EGCG 组和 UVA+EGCG 组分别较单纯 UVB 组和UVA 组降低了52.78%和32.37%,差异有统计学意义(t=2.0742、2.7042,均 P<0.05)。结论UVA、UVB 多次照射后均可上调 HSF 老化概率,加入 EGCG 可进一步上调其老化概率。UVA、UVB 多次照射后均可增加 HSF 的 HPRT 基因位点突变频率,加入 EGCG 可显著减少 HPRT 基因位点突变频率。提示 EGCG 对 UVA、UVB 多次照射 HSF 后的保护干预作用可能与诱导突变细胞老化从而减少细胞突变频率有关。
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单位南京医科大学第一附属医院; 江苏省中医院