丝状支原体丝状亚种SC型LppB基因的克隆与表达纯化

作者：李媛; 辛九庆; 高玉龙; 王砚范

来源：中国生物制品学杂志, 2006, (04): 373-375.

DOI：10.13200/j.cjb.2006.04.50.liy.016

• 丝状支原体丝状亚种SC型(MmmSC)
• LppB基因
• 克隆
• 表达 Mycoplasma mycoides subsp.Mycoides SC(MmmSC)
• LppB gene
• Cloning
• Expression

目的克隆丝状支原体丝状亚种SC型(MmmSC)LppB蛋白基因,并进行表达及纯化。方法通过PCR,扩增MmmSC标准株PG1的LppB全基因,克隆至pMD18-T载体上,并测序鉴定。同时选LppB基因中两个TGA之间903bp片段,与pET30a载体构建重组质粒,进行诱导表达,表达产物经Ni-NTA-His系统纯化。结果PCR扩增的LppB基因长度片段约1869bp,与预期大小相符。将其与NCBI上发布的Afade株、LC型代表株Y-goat和同属的Bovine7株的LppB基因序列相比较,同源性分别为99·8%、92·8%和76·7%,氨基酸同源性分别为99·2%、90·2%和67·0%。经...

• 单位
  中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 兽医生物技术国家重点实验室