Rab5a促进LPS活化的巨噬细胞中细胞因子的表达

作者：孙晓琳; 谢基明; 云小乐; 张威; 康鸿斌; 万永青; 刘竟然; 巩培; 赵世敏; 王玉珍

来源：中国免疫学杂志, 2015, 31(03): 295-299.

• Rab5a
• LPS
• 巨噬细胞
• iNOS
• TNF-α
• IL-6

目的:建立稳定表达Rab5a及其失活突变体Rab5a N133I巨噬细胞系,并分析Rab5a对LPS刺激的RAW264.7巨噬细胞中i NOS、TNF-α和IL-6表达的影响。方法:将Rab5a及其失活突变载体Rab5a N133I转染RAW264.7细胞,通过G418筛选稳定表达细胞系。通过Real-time PCR鉴定稳定表达细胞系。MTT法分析其生长特性,LPS刺激稳定表达细胞系不同时间,检测i NOS、TNF-α和IL-6的表达水平。结果:转染Rab5a/Rab5a N133I细胞Rab5a mRNA水平显著高于对照(P<0.05)。Rab5a过表达促进RAW264.7细胞增殖,而过表达Rab5a N133I细胞增殖显著慢于对照(P<0.05)。Rab5a过表达后,LPS诱导的RAW264.7细胞中i NOS、TNF-α和IL-6的表达显著增高(P<0.01)。然而,过表达Rab5a N133I对LPS诱导的i NOS、TNF-α和IL-6的表达没有显著影响。结论:Rab5a过表达显著促进了LPS活化的RAW264.7细胞中i NOS、TNF-α和IL-6的表达,这种促进作用依赖于其结合GTP的能力。

• 单位
  内蒙古农业大学; 生命科学学院; 内蒙古自治区人民医院; 内蒙古医科大学第一附属医院