细胞信号转导抑制因子3特异性shRNA的构建及鉴定

作者：廖立红; 郑锐丹; 王成斌; 应艳琴; 罗小平

来源：华中科技大学学报(医学版), 2011, (05): 546-549+566.

• 细胞信号转导抑制因子3
• 短发夹RNA
• RNA干扰 suppressor of cytokine signaling 3
• short hairpin RNA
• RNA interference

目的构建针对大鼠细胞信号转导抑制因子3(SOCS-3)基因的短发夹RNA(shRNA)表达载体,选取最有效shRNA模板序列。方法设计并合成编码的shRNA的2条寡核苷酸序列,经退火成互补双链,再克隆至pGPU6/GFP/Neo中构建重组表达载体,转化DH5α菌株,进行序列测定;转染至骨骼肌细胞中。Real-time PCR和Western blot检测各组SOCS-3的表达情况。结果测序证实重组质粒构建成功。4对shRNA模板序列对SOCS-3的表达抑制与空白及阴性对照相比差异均有统计学意义(均P<0.05),且以SOCS-3-shRNA a干预效果较好。结论 SOCS-3特异性shRNA重...

• 单位
  华中科技大学同济医学院附属同济医院